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免疫電泳技術(shù)原理
免疫電泳技術(shù)實(shí)質(zhì)上是在直流電場作用下的凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)。它的原理是將凝膠擴(kuò)散置于直流電場中,在一定的條件下,抗原及抗體離解成為帶正電或負(fù)電的電子,在電場中向異相電荷的電極移動(dòng),所帶凈電荷量越多、顆粒越小,泳動(dòng)速度越快,反之則慢。由于電流加速了抗原、抗體的運(yùn)行速度,縮短了兩者結(jié)合的時(shí)間,加快了沉淀現(xiàn)象的產(chǎn)生。當(dāng)有多種帶電荷的物質(zhì)電泳時(shí),由于靜電荷不同,而區(qū)分成不同區(qū)帶,使抗原決定簇不同的成分得以區(qū)分。
影響因素有:①電場強(qiáng)度;②溶液pH;③離子強(qiáng)度;④電滲等。
總補(bǔ)體溶血活性影響因素
【參考范圍】比色法:60~120kU/L.
【影響因素】
1.在補(bǔ)體測定中標(biāo)本采集與保存極為重要,即待檢標(biāo)本要新鮮。一般靜脈取血后,置室溫1h使血液凝固,分離血清后最好2h之內(nèi)檢測完畢,否則應(yīng)盡快置-20℃保存,避免反復(fù)凍溶,以防補(bǔ)體活性降低。
2.補(bǔ)體活性不甚穩(wěn)定,56℃30min、劇烈振蕩、酸堿、乙醇、乙醚、肥皂、蛋白酶等均可使其滅活,因此檢測所用器皿要潔凈并呈中性。
3.該實(shí)驗(yàn)影響因素較多,操作要嚴(yán)格,溶血素、綿羊紅細(xì)胞等配制要準(zhǔn)確。
【臨床意義】補(bǔ)體是存在于正常人和脊椎動(dòng)物新鮮血清中的一組不耐熱、經(jīng)活化后具有酶活性的復(fù)雜球蛋白,統(tǒng)稱為補(bǔ)體系統(tǒng),目前已發(fā)現(xiàn)該系統(tǒng)包含有30多種可溶性蛋白和膜結(jié)合蛋白,其中大部分由肝臟和脾臟中的巨噬細(xì)胞合成。補(bǔ)體是機(jī)體重要的防御因子,廣泛參與抗微生物防御反應(yīng)及免疫調(diào)節(jié),能與任何一種抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合并被激活,產(chǎn)生溶解靶細(xì)胞、促進(jìn)吞噬、清除免疫復(fù)合物、參與炎癥反應(yīng)等一系列生物活性反應(yīng),同時(shí)也可介導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)及自身免疫性疾病的病理損傷。
1.CH50升高常見于各種急性期反應(yīng),如急性炎癥(風(fēng)濕熱急性期、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈炎、皮肌炎、傷寒、麻疹、黑熱病、肺炎、急性心肌梗死、甲狀腺炎、阻塞性黃疸)、組織損傷、惡性腫瘤特別是肝癌等可較正常高2~3倍。
2.CH50降低補(bǔ)體消耗增加見于血清病、鏈球菌感染后腎小球腎炎、SLE、冷球蛋白血癥、自身免疫性溶血性貧血、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植排斥反應(yīng)等;補(bǔ)體大量喪失見于腎病綜合征、大面積燒傷、外傷、手術(shù)和失血過多;補(bǔ)體合成不足見于肝硬化、慢活肝、急性肝炎重癥患者等。
3.判斷補(bǔ)體檢測結(jié)果時(shí)應(yīng)注意動(dòng)態(tài)觀察,最好數(shù)種補(bǔ)體成分同時(shí)檢測,以便對(duì)患者病情進(jìn)行綜合分析。
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