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顆粒性抗原的制備
免疫原是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體、并能與抗體發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)。能否制得合格的抗體由許多因素決定,而能否制備合格的免疫原則是其前提條件。而且作為診斷試劑的抗原也必須是單一特異性的,即純化的抗原。
自然眾多的物質(zhì)皆可成為免疫原,但絕少是單一成分(除非是合成的基因工程制備的),所以必須將某個(gè)抗原從復(fù)雜的組分中提取出單一的成分。下面介紹有代表性的免疫原制備方法。
顆粒性抗原主要是指細(xì)胞抗原或細(xì)菌抗原。最常用的細(xì)胞抗原為制備溶血素用的綿羊紅細(xì)胞。這種抗原制備比較簡單,采集新鮮綿羊紅細(xì)胞,以無菌鹽水洗滌 3次(每次離心2000r/min10min),最后配成106/ml濃度的細(xì)胞懸液,即可應(yīng)用。
細(xì)菌抗原多用液體或固體培養(yǎng)物經(jīng)集菌后處理。H抗原用有動(dòng)力的菌株,菌液用0.3%~0.5%甲醛處理,而O抗原則需要100℃加溫2~2.5h后應(yīng)用。Vi抗原則應(yīng)在殺菌后再加0.5 %~1%氯化鈣溶液。有時(shí)蟲卵也可做成抗原,如日本血吸蟲卵抗原可制成懸液供免疫用。
有些細(xì)胞膜成分,如組織細(xì)胞膜、血細(xì)胞膜經(jīng)打碎后亦可制成顆?乖。顆?乖瓚乙撼嗜闈釥,多采用靜脈內(nèi)免疫法,較少使用佐劑作皮內(nèi)注射。
誘導(dǎo)免疫耐受
誘導(dǎo)受體對移植物的免疫耐受,是最理想的排斥反應(yīng)防治措施。目前限于研究階段,尚未應(yīng)用于臨床。
研究思路:
1.應(yīng)用大劑量天然可溶性或人工合成的供者HLA分子,通過封閉同種抗原特異性T細(xì)胞的TCR,以誘導(dǎo)受者特異性T細(xì)胞凋亡。
2.輸注可溶性CTLA~4,阻斷被移植組織細(xì)胞的B7與受者T細(xì)胞表面CD28的結(jié)合,干擾共刺激信號的形成。
3.阻斷CD40~CD40L、CD2~LFA3等膜分子的相互作用,使T細(xì)胞功能障礙。
4.借助基因工程技術(shù)制備基因修飾的樹突狀細(xì)胞,介導(dǎo)特異性耐受。
5.T細(xì)胞疫苗,誘導(dǎo)抗獨(dú)特型抗體的產(chǎn)生,破壞移植物特異性T細(xì)胞
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