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蛋白質(zhì)的復(fù)性
蛋白質(zhì)在受到光照、熱、有機(jī)溶劑以及一些變性劑的作用時(shí),次級(jí)鍵受到破壞,導(dǎo)致天然構(gòu)象的破壞,使蛋白質(zhì)的生物活性喪失。如果變性條件劇烈持久,蛋白質(zhì)的變性是不可逆的。如果變性條件不劇烈,這種變性作用是可逆的,說(shuō)明蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化不大。
這時(shí),如果除去變性因素,在適當(dāng)條件下變性蛋白質(zhì)可恢復(fù)其天然構(gòu)象和生物活性,這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)復(fù)性(renaturation)。例如胃蛋白酶加熱至80~90℃時(shí),失去溶解性,也無(wú)消化蛋白質(zhì)的能力,如將溫度再降低到37℃,則又可恢復(fù)溶解性和消化蛋白質(zhì)的能力。
濕熱消毒滅菌
濕熱消毒滅菌是由空氣和水蒸氣導(dǎo)熱,傳熱快,穿透力強(qiáng),濕熱滅菌法比干熱滅菌法所需溫度低、時(shí)間短。
(1)煮沸法 將水煮沸至100℃,保持5-10分鐘可殺滅繁殖體,保持1-3小時(shí)可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1%-2%濃度時(shí),沸點(diǎn)可達(dá)105℃,能增強(qiáng)殺菌作用,還可去污防銹。在高原地區(qū)氣壓低、沸點(diǎn)低的情況下,要延長(zhǎng)消毒時(shí)間(海拔每增高300m,需延長(zhǎng)消毒時(shí)間2分鐘)。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類物品。
煮沸前物品涮洗干凈,打開(kāi)軸節(jié)或蓋子,將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊,以確保物品各面與水接觸。銳利、細(xì)小、易損物品用紗布包裹,以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類放入冷水或溫水中煮;金屬、橡膠類則待水沸后放入。消毒時(shí)間均從水沸后開(kāi)始計(jì)時(shí)。若中途再加入物品,則重新計(jì)時(shí),消毒后及時(shí)取出物品,保持其無(wú)菌狀態(tài)。
經(jīng)煮沸滅菌的物品。“無(wú)菌”有效期不超過(guò)6小時(shí)。
(2)高壓蒸汽滅菌法 高壓蒸汽滅菌器裝置嚴(yán)密,輸入蒸汽不外逸,溫度隨蒸汽壓力增高而升高,當(dāng)壓力增至103-206kPa時(shí),濕度可達(dá)121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌,為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓,不怕潮濕的物品,如敷料、手術(shù)器械、藥品、細(xì)菌培養(yǎng)基等。
潛熱是指當(dāng)lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時(shí),釋放出2255.2J的熱量。
高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵問(wèn)題是為熱的傳導(dǎo)提供良好條件,而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因?yàn)槔淇諝鈱?dǎo)熱性差,阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品,并且還可減低蒸汽分壓使之不能達(dá)到應(yīng)有的溫度。
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