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  免疫擴散法

  先制備含Apo抗體的瓊脂糖凝膠,間隔等距離打孔,加入待測人血清,水平置于溫箱(37℃)保溫24或 48h,抗原從孔中間向周圍擴散,因凝膠板中有相應(yīng)抗體,經(jīng)一定時間擴散后,最后在凝膠孔周圍形成一圓型沉淀圈,測量其圓直徑,以圓的面積大小計算血清中 Apo含量。

  該法要求在測量圓周大小時,一定要精確到0.1mm.這一測定方法可適用于以抗體為試劑販所有微量蛋白的測定,但易受多種因素的影響,難以測準(zhǔn),有淘汰的趨勢。

  糖異生

  糖異生的主要前體是乳酸、丙酮酸、氨基酸及甘油等。在反芻動物的消化道中,經(jīng)細(xì)菌作用能將大量纖維糖異生素等轉(zhuǎn)變成丙酸,后者在體內(nèi)也可轉(zhuǎn)變成糖。

  過程分兩階段:

 、俑鞣N糖異生前體(除甘油外)轉(zhuǎn)變成磷酸烯醇式丙酮酸;

 、诹姿嵯┐际奖徂D(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸葡萄糖,再生成各種單糖或多糖。從丙酮酸開始合成糖的過程雖然與糖酵解的逆反應(yīng)類似,但是由于己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶所催化的三個反應(yīng)很難逆向進(jìn)行。

  在糖異生作用中,己糖激酶和磷酸果糖激酶催化的兩個反應(yīng)的逆過程分別由葡萄糖-6-磷酸酶和果糖1,6-二磷酸酶催化完成。丙酮酸激酶催化的反應(yīng)的逆過程,則通過丙酮酸羧化酶催化丙酮酸生成草酰乙酸,再由磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化生成磷酸烯醇式丙酮酸。糖異生調(diào)節(jié)饑餓時,體內(nèi)脂肪及蛋白質(zhì)分解加強,劇烈運動時肌肉糖酵解加強,均可提供較多的前體加速肝中的糖異生。

  肝細(xì)胞ATP或乙酰輔酶A(CoA)供應(yīng)充分時,能加強丙酮酸羧化而成糖

  腎上腺素、胰高血糖素、腎上腺皮質(zhì)激素都能增加肝細(xì)胞中的糖異生;胰島素則抑制之。

  生理意義:空腹或饑餓時主要靠糖異生維持正常血糖濃度,以滿足腦組織等對葡萄糖持續(xù)消耗的需要,也充分利用了體內(nèi)過多的非糖物質(zhì)如乳酸、戊糖氨基酸等。

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