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免疫標(biāo)記電鏡技術(shù)

　　(1)原理：是利用電鏡下可見的示蹤標(biāo)記物標(biāo)記特異性抗體(或抗原)，使之與組織超薄切片中的相應(yīng)抗原(或抗體)反應(yīng)，形成不溶性免疫復(fù)合物，用電鏡觀察可見的標(biāo)記物，間接證實(shí)免疫反應(yīng)的發(fā)生。

　　(2)常用的免疫標(biāo)記電鏡技術(shù)：

　�、勹F蛋白標(biāo)記免疫電鏡技術(shù)：抗體與鐵蛋白通過低分子量的雙功能試劑結(jié)合為一種雙分子復(fù)合物。

　�、诿笜�(biāo)記免疫電鏡技術(shù)：是以酶作為抗原抗體反應(yīng)的標(biāo)記物，與相應(yīng)的酶底物作用，形成一種不溶性的反應(yīng)產(chǎn)物。包括酶標(biāo)記抗體法、非標(biāo)記抗體酶法和非標(biāo)記的過氧化物酶-抗過氧化物酶技術(shù)(即PAP法)。

　�、勰z體金標(biāo)記免疫電鏡技術(shù)：是利用膠體金在堿性環(huán)境中帶有負(fù)電的性質(zhì)，使其與抗體相吸附，從而將抗體標(biāo)記。當(dāng)用金標(biāo)記的抗體與抗原反應(yīng)時，在光鏡水平膠金液呈現(xiàn)鮮艷的櫻紅色，不需外加染色。

免疫球蛋白的概述

　　(1)免疫球蛋白(Ig)掌握：是由漿細(xì)胞產(chǎn)生，存在于血液和體液(包括組織液和外分泌液)中，也可作為抗原受體表達(dá)于B細(xì)胞表面。多數(shù)Ig具有抗體活性，可以特異性識別和結(jié)合抗原。抗體是機(jī)體在抗原刺激下，由漿細(xì)胞合成分泌產(chǎn)生的具有與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白，即具有免疫功能的球蛋白。所有的抗體均是免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白都是抗體。

　　(2)化學(xué)結(jié)構(gòu)①Ig的基本結(jié)構(gòu)：Ig分子由4條肽鏈借鏈間二硫鍵連接組成，即2條相同的重鏈(H)和2條相同的輕鏈(L)和幾對二硫鍵連接成一個基本單位，稱為單體。IgG、IgE.IgD及多數(shù)血清型IgA皆為單體，分泌型IgA為雙體，IgM為五聚體。

　　②功能區(qū)：Ig分子的H鏈與L鏈各區(qū)段可通過鏈內(nèi)二硫鍵折疊成彼此相似球狀結(jié)構(gòu)，擔(dān)負(fù)特定免疫學(xué)功能，稱為功能區(qū)。L鏈有兩個功能區(qū)，稱為VL、CL.③Ig的水解片段：Ig分子可被許多蛋白酶水解，產(chǎn)生不同的片段。

　　(3)免疫球蛋白的血清型①同種型;②同種異型;③獨(dú)特型：抗原決定簇可在異種、同種異體以及自體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生相對應(yīng)的抗體，稱為抗獨(dú)特型抗體。獨(dú)特型和抗獨(dú)特型抗體將整個抗體組成一個網(wǎng)絡(luò)，稱獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)。

　　(4)免疫球蛋白的生物學(xué)活性抗體是具有雙功能分子，它既可特異性結(jié)合抗原，又可獨(dú)立誘發(fā)或執(zhí)行一系列生物學(xué)效應(yīng)，由抗體分子不同部位分別執(zhí)行。①與抗原結(jié)合作用;②補(bǔ)體活化作用;③親細(xì)胞作用;④調(diào)理作用;⑤膜傳遞作用。

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