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針對尿酮體的常見檢測方法
1.試帶法
基于傳統(tǒng)的濕化學(xué)亞硝基鐵氰化鈉法而設(shè)計(jì)，是目前臨床上最常用的尿酮體篩檢方法。檢測過程簡易快速，尤其適合于床邊檢驗(yàn)。應(yīng)注意不同試帶對丙酮和乙酰乙酸的靈敏度不一。
2.濕化學(xué)法
(1)Rothera法：在堿性條件下，亞硝基鐵氰化鈉可與尿中的乙酰乙酸、丙酮起反應(yīng)呈現(xiàn)紫色，但不與β-羥丁酸起反應(yīng)。
(2)Gerhardt法：高鐵離子(Fe3+)與乙酰乙酸的烯醇式基團(tuán)發(fā)生螯合，形成酒紅色復(fù)合物。
3.片劑法
基本原理為亞硝基鐵氰化鈉法。
關(guān)于間接血凝試驗(yàn)的具體操作過程說明
1.載體
紅細(xì)胞是大小均一的載體顆粒，最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細(xì)胞及O凝型人紅細(xì)胞。新鮮紅細(xì)胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力較差。致敏的新鮮紅細(xì)胞保存時(shí)間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用2～3d.為此一般在致敏前先將紅細(xì)胞醛化，可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細(xì)胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。醛化紅細(xì)胞具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力，血凝反應(yīng)的效果基本上與新鮮紅細(xì)胞相似。如用兩種不同醛類處理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸處理。醛化紅細(xì)胞能耐60C的加熱，并可反復(fù)凍融不破碎，在4℃環(huán)境中可保存3-6個(gè)月，在一20℃的環(huán)境中可保存1年以上。
2.致敏
致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白質(zhì)致敏紅在低pH，低離子濃度下，用醛化紅細(xì)胞直接吸附即可。間接法則需用耦聯(lián)劑將蛋白質(zhì)結(jié)合到紅細(xì)胞上。常用耦聯(lián)劑為雙耦氮聯(lián)苯胺(bis-diazotized benzidine，BDB)和氯化鉻。前者通過共價(jià)鍵，后者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質(zhì)與紅細(xì)胞表面結(jié)合而達(dá)到致敏的目
3.血凝
試驗(yàn)可在微量滴定板或試管中進(jìn)行，將標(biāo)本倍比稀釋，一般為1：64，同時(shí)設(shè)不含標(biāo)本的稀釋液對照孔。在含稀釋標(biāo)本1滴的板孔(或試管)中，加入0.5%致敏紅細(xì)胞懸液1滴，充分混勻，置室溫1～2h，即可觀察結(jié)果。凡紅細(xì)胞沉積于孔底，集中呈1圓點(diǎn)的為不凝集(一)。如紅細(xì)胞凝集，則分布于孔底周圍。根據(jù)紅細(xì)胞凝集的程度判斷陽性反應(yīng)的強(qiáng)弱，以抖凝集的孔為滴度終點(diǎn)。
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