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網(wǎng)織紅細胞成為成熟的紅細胞的時間
紅細胞主要在骨髓發(fā)生、發(fā)育與成熟,骨髓中的造血干細胞在多種刺激因素的作用下,依次演變?yōu)樵技t細胞、早幼紅細胞、中幼紅細胞和晚幼紅細胞,晚幼紅細胞不再具備分裂能力,脫核后成熟為網(wǎng)織紅細胞,整個過程需要72h。網(wǎng)織紅細胞繼續(xù)成熟,約48h后發(fā)育為成熟的紅細胞。
測定血沉的方法
、傥菏戏(Westergren法):將離體抗凝血液置于特制刻度測定管內(nèi),垂直立于室溫中,1h準紅細胞層下沉距離,用毫米(mm)數(shù)值報告。
②血沉儀法:用發(fā)光二極管、光電管檢測紅細胞和血漿界面的透光度改變,得到血沉值,顯示紅細胞沉降高度(H)與時間(t)關(guān)系的H-t曲線。
抗凝劑與血液比例為1:4.
精子活動力分級
WHO建議將精子活動力分為4級:
、倏焖偾跋蜻\動(Ⅲ級:直線運動);
②慢或呆滯的前向運動(Ⅱ級:運動緩慢);
、鄯乔跋蜻\動(Ⅰ級:原地運動);
④不動(0級:不活動)。
參考值:WHO規(guī)定正常生育者精子活動力:射精后60min內(nèi),Ⅲ級精子應>25%;或Ⅲ和Ⅱ級精子的總和>50%.
ONPG的概念
(1)原理:有的細菌可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,能分解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG),而生成黃色的-硝基酚(O-nitrophenol),在很低濃度下也可檢出。
(2)試劑:0.75M ONPG溶液:取80mg溶于15ml蒸餾水中,在加入緩沖液(6.9gNaH2PO4,溶于45ml蒸餾水中,用30%NaOH調(diào)整pH為7.0,再加水至50ml)5ml,置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液為無色,如出現(xiàn)黃色,則不應再用。
(3)方法:從培養(yǎng)基上取菌,于0.25ml無菌生理鹽水中制成菌懸液,加入一滴甲苯并充分振搖,使酶釋放。將試管置37℃水浴5分鐘,加入0.25ml ONPG試劑,水浴20分鐘~3小時觀察結(jié)果。
(4)結(jié)果:菌懸液呈現(xiàn)黃色為陽性反應,一般在20~30分鐘內(nèi)顯色。
(5)應用:迅速及遲緩分解乳糖的細菌ONPG試驗為陽性,而不發(fā)酵乳糖的細菌為陰性。本實驗主要用于遲緩發(fā)酵乳糖菌株的快速鑒定。
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