異丙醇沉淀試驗(yàn)
原理:
不穩(wěn)定血紅蛋白較正常血紅蛋白更容易裂解,在異丙醇這種能降低血紅蛋白分子內(nèi)部的氫鍵的非極性溶劑中,不穩(wěn)定血紅蛋白更快地沉淀。通過觀察血紅蛋白液在異丙醇中的沉淀現(xiàn)象對(duì)不穩(wěn)定血紅蛋白進(jìn)行篩檢。
結(jié)果:
正常人血紅蛋白液為陰性(30min內(nèi)不沉淀)。
臨床意義:
不穩(wěn)定血紅蛋白(包括HbH)于5min時(shí)出現(xiàn)沉淀,20min內(nèi)沉淀逐漸增加,甚至成絮狀或粗顆粒狀。血液中含有較多HbF、HbH、HbE時(shí)也可出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。
紅細(xì)胞包涵體試驗(yàn)
原理:
將煌焦油藍(lán)液與新鮮血液一起孵育,不穩(wěn)定血紅蛋白易變性沉淀形成包涵體。
結(jié)果:
陰性。
臨床意義:
不穩(wěn)定血紅蛋白病、HbH病呈陽(yáng)性。
HbA2測(cè)定
HbA2測(cè)定原理:
根據(jù)不同的血紅蛋白帶有不同的電荷,等電點(diǎn)不同,在一定的pH緩沖液中,緩沖液的pH大于Hb的等電點(diǎn)時(shí)其帶負(fù)電荷,電泳時(shí)在電場(chǎng)中向陽(yáng)極泳動(dòng),反之,Hb帶正電荷向陰極泳動(dòng)。經(jīng)一定電壓和時(shí)間的電泳,不同的血紅蛋白所帶電荷不同、相對(duì)分子質(zhì)量不同,其泳動(dòng)方向和速度不同,可分離出各自的區(qū)帶,同時(shí)對(duì)電泳出的各區(qū)帶進(jìn)行電泳掃描,可進(jìn)行各種血紅蛋白的定量分析。
HbA2測(cè)定的參考值與臨床意義
參考值:
1.2%~3.5%。
臨床意義:
同血紅蛋白電泳。
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