初級檢驗技師考試輔導(dǎo):肥達(dá)氏反應(yīng)操作規(guī)程

　　初級檢驗技師考試輔導(dǎo):肥達(dá)氏反應(yīng)操作規(guī)程

　　[實驗原理]

　　本法是以傷寒"O"，"H";甲，乙，丙副傷寒分別培育，經(jīng)甲醛處理殺死后，做成菌液供 肥達(dá)氏應(yīng)用，用以傷寒的輔助診斷。

　　[操作方法]

　　1、 取康氏試管，排成5 × 7形式，5 排分別編成O，H，A，B，C; 

　　2、 另取大試管一支，加入病人血清0.25ml，用4.75ml生理鹽水作1：20稀釋，取2.5ml該稀釋血清于每排第一管內(nèi)分別注入0.5ml;

　　3、再取2.5ml生理鹽水把大試管內(nèi)血清作2 倍稀釋， 取2.5ml該稀釋血清于每排第二管內(nèi)分別注入0.5ml，以此類推 ， 每排最后一管加0.5ml生理鹽水作陰性對照， 各稀釋度：1/20，1/40，1/80，1/160，1/320.然后于前六管中逐管加入1：10稀釋的各菌液0.5ml， 各終稀釋度：1/40，1/80，1/160，1/320，1/640.

　　4、充分振蕩混勻，于37℃放置16-20小時判定結(jié)果。

　　[結(jié)果判定]

　　根據(jù)凝集反應(yīng)的強(qiáng)弱和有無，分別以4+，3+，2+，1+，-，記錄，以呈現(xiàn)(2+)的血清最高稀釋度為終點效價。

　　4+：液體清澈透明，菌體全部被凝成塊，沉于管底。

　　3+：液體較透明，大部分菌體被凝集而沉于管底。

　　2+：液體稍透明，管底有少量凝集沉淀物。

　　1+：液體較混濁，可見極少量凝集物。

　　-：液體混濁，細(xì)菌因重力下降于管底呈邊緣光滑圓點(與對照管相似)。