一、A1
1、
【正確答案】 C
【答案解析】 有限稀釋法不需特殊設(shè)備,克隆出現(xiàn)率高,為實(shí)驗(yàn)室最常用的方法。
2、
【正確答案】 C
【答案解析】 雜交瘤技術(shù)的原理是利用聚乙二醇(PEG)為細(xì)胞融合劑,使免疫的小鼠脾細(xì)胞與具有體外長(zhǎng)期繁殖能力的小鼠骨髓瘤細(xì)胞融為一體,在HAT選擇性培養(yǎng)基的作用下,只讓融合成功的雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng),經(jīng)過(guò)反復(fù)的免疫學(xué)檢測(cè)、篩選和單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)(克隆化),最終獲得既能產(chǎn)生所需單克隆抗體,又能長(zhǎng)期繁殖的雜交瘤細(xì)胞系。
3、
【正確答案】 B
【答案解析】 雜交瘤細(xì)胞由骨髓瘤細(xì)胞和脾細(xì)胞融合形成的,其合成DNA的主要途徑雖然被氨基蝶呤(A)阻斷。
4、
【正確答案】 A
【答案解析】 雜交瘤細(xì)胞有骨髓瘤細(xì)胞和脾細(xì)胞融合形成的,其合成DNA的主要途徑雖然被氨基蝶呤阻斷,但由于與脾細(xì)胞融合,可獲得其HGPRT,利用次黃嘌呤合成為嘌呤堿,最終與嘧啶一起合成DNA。因此,雜交瘤細(xì)胞在選擇性得以生存,故能夠在HAT培養(yǎng)基長(zhǎng)期存活。
5、
【正確答案】 B
【答案解析】 單克隆抗體來(lái)源于一個(gè)(克隆)B細(xì)胞,因此具有兩個(gè)完全相同的抗原結(jié)合部位。其他都不是單克隆抗體分子都有的特性。
6、
【正確答案】 D
【答案解析】 細(xì)胞融合的選擇培養(yǎng)基中有三種關(guān)鍵成分:次黃嘌呤(H)、甲氨蝶呤(A)、胸腺嘧啶核苷(T),所以取三者的字頭稱為HAT培養(yǎng)基。只有融合細(xì)胞具有親代雙方遺傳性能,才能在HAT培養(yǎng)基上長(zhǎng)期存活與繁殖,如雜交瘤細(xì)胞。
7、
【正確答案】 E
【答案解析】 克隆化培養(yǎng)后的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞應(yīng)及時(shí)凍存,最好保存在-196℃液氮中。
8、
【正確答案】 D
【答案解析】 人源化抗體主要指鼠源單克隆抗體以基因克隆及DNA重組技術(shù)改造,重新表達(dá)的抗體,其大部分氨基酸序列為人源序列取代,基本保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性,又降低了其異源性,有利于人體。
9、
【正確答案】 B
【答案解析】 制備單克隆抗體時(shí),可采用動(dòng)物體內(nèi)誘生方法:先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑,一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔,1~2周后,無(wú)菌抽取腹水,離心取上清液即可。
10、
【正確答案】 B
【答案解析】 單克隆抗體制備時(shí)最佳的融合效果應(yīng)是最低程度的細(xì)胞損傷而又產(chǎn)生最高頻率的融合。聚乙二醇(PEG1000~2000)是目前最常用的細(xì)胞融合劑,一般應(yīng)用濃度為40%(W/V)。
11、
【正確答案】 E
【答案解析】 制備單克隆抗體常選用小鼠的腹腔細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞。先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑,一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔,1~2周后,無(wú)菌抽取腹水,離心取上清液即可。
12、
【正確答案】 C
【答案解析】 細(xì)胞在傳代過(guò)程中,部分細(xì)胞可能有返祖現(xiàn)象,應(yīng)定期用8-氮鳥嘌呤(8-AG)進(jìn)行處理,使生存的細(xì)胞對(duì)HAT呈均一的敏感性。
13、
【正確答案】 E
【答案解析】 雙特異性不同的兩個(gè)小分子抗體連接在一起可得到雙特異性抗體。雙特異性抗體能同時(shí)結(jié)合兩種抗原,因而可介導(dǎo)標(biāo)記物與靶抗原結(jié)合或某些效應(yīng)因子定位于靶細(xì)胞,在免疫學(xué)檢測(cè)中可簡(jiǎn)化操作步驟,提高檢驗(yàn)質(zhì)量;應(yīng)用雙特異性抗體介導(dǎo)的藥物殺傷效應(yīng)可用于腫瘤等的治療。
14、
【正確答案】 E
【答案解析】 甲氨蝶呤(A)是葉酸的拮抗藥,可阻斷瘤細(xì)胞利用正常途徑合成DNA。
15、
【正確答案】 C
【答案解析】 單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中用于:①作為診斷試劑,用于診斷各類病原體,目前這是McAb應(yīng)用最多的領(lǐng)域之一;②腫瘤特異性抗原和相關(guān)抗原的檢測(cè)。用于腫瘤的診斷、分型及定位;③檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物,用于區(qū)分細(xì)胞亞群和細(xì)胞分化階段;④抗原微量成分的檢測(cè)及對(duì)酶類、激素、維生素、藥物等的檢測(cè);⑤在防治工作中如惡性腫瘤的治療,“生物導(dǎo)彈”的研制等都有廣泛前景;⑥研究工作中用作“探針”,確定大分子生物物質(zhì)在細(xì)胞中的分布及位置;⑦用于抗原物質(zhì)的提取及純化。
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