2010執(zhí)業(yè)藥師考試藥學(xué)專業(yè)知識(一)復(fù)習(xí)要點(diǎn)(11)

　　熒光薄層板：熒光淬滅法

　　普通薄層板 有色 直接檢視;無色 顯色檢視

　　通用型顯色劑：碘、硫酸溶液、熒光黃溶液

　　(四)色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

　　目的： 使斑點(diǎn)的檢測靈敏度、比移值(Rf)和分離效能符合規(guī)定

　　1.檢測靈敏度

　　2.比移值(Rf)—— 基本定性參數(shù) ： Rf = l / lo

　　Rf 最佳范圍0.3～0.5;可用范圍0.2～0.8。

　　3. 分離效能 分離度(R)表示 R=2d /(W1+W2)

　　★四、應(yīng)用：TLC法主要用于藥品的鑒別或雜質(zhì)檢查。

　　(一)鑒別：

　　將同濃度的供試品溶液、對照品溶液點(diǎn)在同一薄層板上¾®展開顯色后¾®供試品、對照品顏色與比移值Rf均一致¾®可認(rèn)為供試品與對照品是同一物質(zhì)。

　　(1)與對照品比較Rf值 (2)與結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)比較Rf值

　　(二) 雜質(zhì)檢查

　　1. 雜質(zhì)對照品法： 雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與雜質(zhì)對照品斑點(diǎn)比較，不得更深¾®可認(rèn)為未超過規(guī)定的雜質(zhì)最高限量。

　　2.自身稀釋對照法(高低濃度對比法) 適用于得不到雜質(zhì)對照品的情況

　　供試品溶液按限度規(guī)定稀釋成另一低濃度溶液或系列溶液，為對照溶液。供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)與相應(yīng)的自身稀釋對照液所顯主斑點(diǎn)比較，顏色不得更深

　　§3. 高效液相色譜法(HPLC)

　　high performance liquid chromatography HPLC

　　★一、基本原理

　　樣品中各組分在固定相與流動(dòng)相之間分配，由于各組分的分配系數(shù)不等，他們按分配系數(shù)大小的順序依次被流動(dòng)相帶出色譜柱。K小的組分先流出，K大的組分后流出。

　　(一) 基本概念

　　1.色譜圖和色譜峰

　　色譜圖或流出曲線：色譜響應(yīng)信號隨時(shí)間的變化曲線

　　色譜峰：流出曲線上的突起部分。

　　正常：正態(tài)分布曲線;不正常：拖尾峰和前延峰。色譜峰正常與否用拖尾因子衡量。

　　每個(gè)組分的色譜峰可用三項(xiàng)參數(shù)說明

　　峰高或峰面積：用于定量。 峰寬W：用于衡量柱效

　　峰位：用保留值tR表示，用于定性。

　　2. 基線

　　在色譜分離過程中，沒有組分流出時(shí)的流出曲線。反映色譜系統(tǒng)(主要是檢測器)的噪音水平

　　3. 保留值

　　保留時(shí)間( tR )、死時(shí)間( t0 )、 調(diào)整保留時(shí)間(tR ´): tR ´= tR - t0

　　相對保留值(r)：即選擇性因子， r2,1= tR2´/ tR1´= k2/k1

　　4. 色譜峰區(qū)域?qū)挾?越小，流出組分越集中，有利于分離

　　標(biāo)準(zhǔn)差( )、半高峰寬( Wh/2)、峰寬(W)

　　★★(二) 塔板理論

　　色譜柱踏板數(shù)大于103時(shí)，流出曲線趨于正態(tài)分布。

　　理論踏板高(H)可由柱長(L)和理論踏板數(shù) n 計(jì)算：

　　H = L /n n = 5.54 (tR/Wh/2)2

　　記錄紙速(mm/min)：轉(zhuǎn)換分子、分母單位相同的參數(shù)。聯(lián)系時(shí)間單位與長度單位。

　　H 和 n 都是柱效指標(biāo)，可用于評價(jià)柱效高低。 塔板數(shù)越多，塔板高度越小，柱效越高

　　例：用HPLC法測得某組分的保留時(shí)間tR為1.5 min，半峰寬Wh/2為0.2 cm;記錄紙速為2.0 cm/min，則柱效為：

　　A. 1246

　　B. 2492

　　C. 623

　　D. 1800

　　E. 311

　　n=5.54(tR/ Wh/2)2 =5.54(1.5×2.0/0.2)2 =1246