(三) 速率理論 Van Deemter方程,范氏方程:H = A + B/u + Cu
A為渦流擴(kuò)散項(xiàng),B為縱向擴(kuò)散系數(shù),C為傳質(zhì)阻抗項(xiàng)
HPLC中范式方程簡(jiǎn)化為: H = A + Cu
二、高效液相色譜儀
(一)儀器的基本結(jié)構(gòu)
高壓輸液泵、色譜柱、進(jìn)樣閥、檢測(cè)器
(二)檢測(cè)器的類型和適用范圍
1. 選擇性檢測(cè)器:也稱濃度型檢測(cè)器,包括紫外檢測(cè)器、光二極管陣列檢測(cè)器DAD、熒光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器。
(1)紫外檢測(cè)器:最常用。適于有共軛結(jié)構(gòu)的化合物如芳香化合物、核酸及甾體激素等。
(2)光二極管陣列檢測(cè)器 diode-array detector, DAD
(3)熒光檢測(cè)器:僅適用于在流動(dòng)相條件下具有熒光或經(jīng)衍生轉(zhuǎn)化為具有熒光的化合物
(4)電化學(xué)檢測(cè)器: 僅適用于在流動(dòng)相條件下可發(fā)生氧化-還原反應(yīng)的化合物的檢測(cè)。
(5)質(zhì)譜檢測(cè)器:主要應(yīng)用于大分子物質(zhì)的檢測(cè),如蛋白質(zhì)、多肽等,以及色譜峰的純度或原料藥中的雜質(zhì)檢查。
2. 通用型檢測(cè)器:也稱質(zhì)量型檢測(cè)器,包括示差折光檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)。
ELSD 僅適用于UV檢測(cè)困難的物質(zhì)的分析,如糖類和脂質(zhì)等,以及藥物雜質(zhì)的確認(rèn)。
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