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接合菌病的輔助檢查
1.直接鏡檢在臨床標(biāo)本中可見(jiàn)寬大的、10~15μm寬,絕大多數(shù)無(wú)隔膜、薄壁的菌絲,常呈灶性球根部膨脹和不規(guī)則的分支。刮片、痰和分染色(calcofluor)觀察。從壞死組織,痰或支氣管肺泡沖洗液的臨床標(biāo)本中直接鏡檢發(fā)現(xiàn)毛霉較培養(yǎng)分離更有意義。鏡下本菌與其他真菌,如曲霉屬很容易區(qū)別。
2.真菌培養(yǎng)毛霉目對(duì)營(yíng)養(yǎng)沒(méi)有特別要求,可在不含放線菌酮的常規(guī)真菌培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。原代分離培養(yǎng)基中應(yīng)含有氯霉素或慶大霉素。推薦以葡萄糖作為碳源,以銨或蛋白胨作為氮源。一般以含抗生素的沙堡瓊脂作為原代分離培養(yǎng)基,以馬鈴薯瓊脂作為菌種保存和鑒別之用。硫胺是一些菌種唯一需要的生長(zhǎng)因子,如傘枝犁頭霉。大多數(shù)毛霉目產(chǎn)孢豐富,生長(zhǎng)迅速,在幾天內(nèi)可將整個(gè)培養(yǎng)基充滿,并推開(kāi)蓋子。然而,有些菌種如雅致節(jié)壺霉和脈管狀瓶霉鑒別相對(duì)困難,因?yàn)樵蛛x中多不能產(chǎn)孢而需傳代至馬鈴薯葡萄糖瓊脂。產(chǎn)孢可以在營(yíng)養(yǎng)缺陷的培養(yǎng)基中刺激,如玉米粉葡萄糖蔗糖酵母提取物瓊脂等。
蟲(chóng)霉目在沙堡瓊脂上菌落呈黃色至灰色,邊緣受限,外觀薄,蠟樣光澤,上有放射狀溝紋。接合孢子在培養(yǎng)10天左右典型,壁光滑,并可見(jiàn)由接合孢子生成的菌絲構(gòu)成的龜嘴樣結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)日久時(shí)可見(jiàn)較多的20~40μm大小的厚壁孢子。次生孢子由在分生孢子梗上的分子孢子直接生成。
組織病理:毛霉目感染的組織病理無(wú)明顯特異性,常有水腫和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),罕見(jiàn)強(qiáng)炎癥反應(yīng),這是因?yàn)榛颊呙庖吡Φ拖。可?jiàn)寬的,緞帶樣的菌絲,直徑7~15μm,直角分叉,有診斷價(jià)值。菌絲無(wú)隔或分隔極少。有時(shí)因?yàn)楸诒,菌絲可扭曲和折疊,似有許多隔。有時(shí)菌絲并不寬大,但仍有直角分支。偶可見(jiàn)到厚壁孢子。血管常受菌絲侵犯,導(dǎo)致鄰近組織壞死。其他組織病理改變還包括伴急性和慢性浸潤(rùn)的壞死,并累及血管。血管浸潤(rùn)常導(dǎo)致血栓、阻塞和血管壞死。有時(shí),通氣良好的鼻部和肺部組織中可以見(jiàn)到孢子囊中輪廓清楚的小柱的孢子囊孢子。
近年來(lái)才將CT、磁共振、細(xì)針吸取等技術(shù)應(yīng)用于診斷系統(tǒng)性或鼻腦型毛霉目感染,并用間接酶聯(lián)吸附試驗(yàn)作病原學(xué)檢測(cè),但尚需積累經(jīng)驗(yàn)。
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