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2014年臨床助理醫(yī)師綜合筆試精華輔導資料(6)

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接合菌病的輔助檢查

  1.直接鏡檢在臨床標本中可見寬大的、10~15μm寬,絕大多數(shù)無隔膜、薄壁的菌絲,常呈灶性球根部膨脹和不規(guī)則的分支。刮片、痰和分染色(calcofluor)觀察。從壞死組織,痰或支氣管肺泡沖洗液的臨床標本中直接鏡檢發(fā)現(xiàn)毛霉較培養(yǎng)分離更有意義。鏡下本菌與其他真菌,如曲霉屬很容易區(qū)別。

  2.真菌培養(yǎng)毛霉目對營養(yǎng)沒有特別要求,可在不含放線菌酮的常規(guī)真菌培養(yǎng)基上生長。原代分離培養(yǎng)基中應含有氯霉素或慶大霉素。推薦以葡萄糖作為碳源,以銨或蛋白胨作為氮源。一般以含抗生素的沙堡瓊脂作為原代分離培養(yǎng)基,以馬鈴薯瓊脂作為菌種保存和鑒別之用。硫胺是一些菌種唯一需要的生長因子,如傘枝犁頭霉。大多數(shù)毛霉目產(chǎn)孢豐富,生長迅速,在幾天內(nèi)可將整個培養(yǎng)基充滿,并推開蓋子。然而,有些菌種如雅致節(jié)壺霉和脈管狀瓶霉鑒別相對困難,因為原代分離中多不能產(chǎn)孢而需傳代至馬鈴薯葡萄糖瓊脂。產(chǎn)孢可以在營養(yǎng)缺陷的培養(yǎng)基中刺激,如玉米粉葡萄糖蔗糖酵母提取物瓊脂等。

  蟲霉目在沙堡瓊脂上菌落呈黃色至灰色,邊緣受限,外觀薄,蠟樣光澤,上有放射狀溝紋。接合孢子在培養(yǎng)10天左右典型,壁光滑,并可見由接合孢子生成的菌絲構(gòu)成的龜嘴樣結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)日久時可見較多的20~40μm大小的厚壁孢子。次生孢子由在分生孢子梗上的分子孢子直接生成。

  組織病理:毛霉目感染的組織病理無明顯特異性,常有水腫和中性粒細胞浸潤,罕見強炎癥反應,這是因為患者免疫力低下?梢妼挼,緞帶樣的菌絲,直徑7~15μm,直角分叉,有診斷價值。菌絲無隔或分隔極少。有時因為壁薄,菌絲可扭曲和折疊,似有許多隔。有時菌絲并不寬大,但仍有直角分支。偶可見到厚壁孢子。血管常受菌絲侵犯,導致鄰近組織壞死。其他組織病理改變還包括伴急性和慢性浸潤的壞死,并累及血管。血管浸潤常導致血栓、阻塞和血管壞死。有時,通氣良好的鼻部和肺部組織中可以見到孢子囊中輪廓清楚的小柱的孢子囊孢子。

  近年來才將CT、磁共振、細針吸取等技術應用于診斷系統(tǒng)性或鼻腦型毛霉目感染,并用間接酶聯(lián)吸附試驗作病原學檢測,但尚需積累經(jīng)驗。

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