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2017年執(zhí)業(yè)藥師《藥物分析》考試章節(jié)知識(shí)點(diǎn)(13)

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第 1 頁(yè):第一節(jié) 可見(jiàn)紫外分光光度法
第 2 頁(yè):第二節(jié) 熒光分析法
第 3 頁(yè):第三節(jié) 紅外分光光度法

  第二節(jié) 熒光分析法

  了解熒光分析法的基本原理和應(yīng)用;熒光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)。

  一、基本原理

  熒光的產(chǎn)生:此化學(xué)物質(zhì)能從外界吸收并儲(chǔ)存能量(如光能、化學(xué)能等)而進(jìn)入激發(fā)態(tài),當(dāng)其從激發(fā)態(tài)再回復(fù)到基態(tài)時(shí),過(guò)剩的能量可以電磁輻射的形式放射(即發(fā)光)。熒光發(fā)射的特點(diǎn)是:可產(chǎn)生熒光的分子或原子在接受能量后即刻引起發(fā)光;而一旦停止供能,發(fā)光(熒光)現(xiàn)象也隨之在瞬間內(nèi)消失。

  發(fā)射熒光的光量子數(shù)亦即熒光強(qiáng)度,除受激發(fā)光強(qiáng)度影響外,也與激發(fā)光的波長(zhǎng)有關(guān)。各個(gè)熒光分子有其特定的吸收光譜和發(fā)射光譜(熒光光譜),即在某一特定波長(zhǎng)處有最大吸收峰和最大發(fā)射峰。選擇激發(fā)光波長(zhǎng)量接近于熒光分子的最大吸收峰波長(zhǎng),且測(cè)定光波量接近于最大發(fā)射光波峰時(shí),得到的熒光強(qiáng)度也最大。

  物質(zhì)的激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜,可以用作該物質(zhì)的定性分析。當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度、波長(zhǎng)、所用溶劑及溫度等條件固定時(shí),物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi),其發(fā)射光強(qiáng)度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比關(guān)系,可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高,濃度太大的溶液會(huì)有“自熄滅”作用,故熒光分析法應(yīng)在低濃度溶液中進(jìn)行。

  二、熒光分光光度計(jì)

  激發(fā)光源→激發(fā)光單色器→樣品池

  ↓

  發(fā)射光單色器→檢測(cè)器→數(shù)據(jù)記錄處理

  樣品池用低熒光材料制成,四面透光,發(fā)射光方向與激發(fā)光成直角。

  三、應(yīng)用:熒光分析可用于鑒別和含量測(cè)定。一般采用對(duì)照品比較法測(cè)定含量,靈敏度高、選擇性好,但干擾多、線性范圍窄,多用于需要高靈敏度和允許較大變異性的樣品分析。

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