1.提取
提取鞣質(zhì)的中藥原料最好用新鮮原料,且宜立即浸提,也可以用冷凍或浸泡在丙酮中的方法貯存。原料的干燥宜在盡短的時(shí)間內(nèi)完成,以避免鞣質(zhì)在水分、日光、氧氣和酶的作用下變質(zhì)。
提取將藥材粉碎,過篩,用95%乙醇冷浸或滲漉提取,提取液或滲漉液減壓濃縮成浸膏。
2.分離
(1)溶劑法:通常將含鞣質(zhì)的水液先用乙醚等極性小的溶劑萃取,除去極性小的雜質(zhì),然后用乙酸乙酯提取,可得到較純的鞣質(zhì)。亦可將鞣質(zhì)粗品溶于少量乙醇和乙酸乙酯中,逐漸加入乙醚,鞣質(zhì)可沉淀析出。
(2)沉淀法:向含鞣質(zhì)的水液中分批加入明膠溶液,濾取沉淀,用丙酮回流,鞣質(zhì)溶于丙酮,蛋白質(zhì)不溶于丙酮而析出。
(3)柱色譜法:普遍采用的固定相是Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,Sephadex LH-20及MCIGelC HP-20.以水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮為流動(dòng)相(洗脫劑)。
(4)高效液相色譜法:HPLC法對(duì)鞣質(zhì)不僅具有良好的分離效果,而且還可以用于判斷鞣質(zhì)分子的大小、各組分的純度及α、β-異構(gòu)體等,具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、實(shí)用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
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