醫(yī)師實(shí)踐技能考試輔導(dǎo)：硝酸鹽還原試驗(yàn)

　　(1)原理：硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程：一是在合成過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其他含氮化合物;二是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。能使硝酸鹽還原的細(xì)菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物。但硝酸鹽還原的過程因細(xì)菌不同而異，有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希菌;有的細(xì)菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨;有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如假單胞菌等。硝酸鹽還原試驗(yàn)系測(cè)定還原過程中所產(chǎn)生的亞硝酸。

　　(2)培養(yǎng)基：硝酸鹽培養(yǎng)基。

　　(3)試劑：甲液(對(duì)氨基苯磺酸0.8g+5mol/L醋酸lOOml;乙液(α-奈胺0.5g+5mol/L醋酸lOOml)。

　　(4)方法：被檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基中，于35℃培養(yǎng)l～4d.將甲、乙液等量混合后(約0.1m1)加入培養(yǎng)基內(nèi)，立即觀察結(jié)果。

　　(5)結(jié)果：出現(xiàn)紅色為陽性。若加入試劑后無顏色反應(yīng)，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗(yàn)陰性;②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果，這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉，如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。若仍不產(chǎn)生紅色，表示試驗(yàn)為假陰性。

　　若要檢查是否有氮?dú)猱a(chǎn)生，可在培養(yǎng)基管內(nèi)加一小倒管，如有氣泡產(chǎn)生，表示有氮?dú)馍�成�?/P>

　　(6)應(yīng)用：本試驗(yàn)在細(xì)菌鑒定中廣泛應(yīng)用。腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽;銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等假單胞菌可產(chǎn)生氮?dú)?有些厭氧菌如韋榮球菌等試驗(yàn)也為陽性。