2014臨床助理《微生物學(xué)》講義：第二十五單元

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　　第二十五單元 病毒感染的檢查方法和防治原則

　　重點(diǎn)提示

　　本單元2000～2009年約考過l題。

　　本單元題量不大�？忌鷳�(yīng)重點(diǎn)掌握病毒感染免疫預(yù)防中主動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫的特點(diǎn)及常用制劑。熟悉病毒分離培養(yǎng)方法、病毒感染的血清學(xué)診斷方法。了解標(biāo)本的采集和送檢。

　　考點(diǎn)串講

　　一、病毒感染的檢查方法

　　(一)標(biāo)本的采集與送檢

　　1.供分離病毒、檢出核酸及抗原的標(biāo)本采集原則

　　(1)標(biāo)本采集時(shí)間：在發(fā)病初期(急性期)采集標(biāo)本，較易檢出病毒。

　　(2)標(biāo)本采集部位：最好在感染部位采取。

　　(3)標(biāo)本運(yùn)輸：盡快冷藏送檢，標(biāo)本在處理、接種前切忌反復(fù)凍融，病變組織則應(yīng)保存于50%的甘油緩沖鹽水中。

　　(4)標(biāo)本的處理與儲(chǔ)存：采集標(biāo)本時(shí)要注意無菌操作。臨床標(biāo)本中可加入高濃度的抗生素。盡量及時(shí)接種，如不能當(dāng)時(shí)接種，標(biāo)本應(yīng)保存在一70℃低溫冰柜或液氮中。

　　2.供血清學(xué)檢測(cè)的標(biāo)本采集原則 檢測(cè)特異性抗體需要采取急性期與恢復(fù)期雙份血清，血清標(biāo)本應(yīng)在一20℃保存，試驗(yàn)前血清標(biāo)本以56℃30min處理去除非特異性物質(zhì)及補(bǔ)體。

　　(二)病毒分離

　　1.細(xì)胞培養(yǎng)

　　(1)培養(yǎng)細(xì)胞分類

　�、僭�代細(xì)胞：常用人胚腎、猴腎、雞胚等原代細(xì)胞，對(duì)病毒的敏感性高，可用于生產(chǎn)病毒疫苗，但不能持續(xù)傳代培養(yǎng)，故不便用于診斷。

　�、诙�倍體細(xì)胞：染色體數(shù)為二倍體，生長迅速，并可傳50代保持二倍體特征，可用于制備病毒疫苗，也可用于病毒的實(shí)驗(yàn)室診斷。

　�、蹅鞔�細(xì)胞系：由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來，染色體數(shù)為非整倍數(shù)，細(xì)胞生長迅速，可無限傳代，在液氮中能長期保存，目前廣泛用于病毒的實(shí)驗(yàn)室診斷。

　　(2)細(xì)胞培養(yǎng)中病毒的鑒定

　�、俨《驹诩�(xì)胞內(nèi)增殖的特征：細(xì)胞病變效應(yīng)、紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象、干擾現(xiàn)象。

　�、诓《靖腥拘缘亩�量測(cè)定：空斑形成單位測(cè)定、50%致死量(LD50)和50%組織細(xì)胞感染量(TCID50)的測(cè)定、病毒形態(tài)與結(jié)構(gòu)的觀察。

　�、鄄《镜牟≡瓕W(xué)鑒定。

　　2.動(dòng)物接種 常用大鼠、小鼠、豚鼠、家兔和猴等動(dòng)物。

　　3.雞胚接種

　　(三)病毒抗原的檢測(cè)

　　1.免疫熒光法

　　2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)

　　(四)病毒抗體的檢測(cè)

　　1.中和試驗(yàn) 病毒在活體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)中被特異性中和抗體作用而失去感染性的一種試驗(yàn)。

　　2.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 常用病毒內(nèi)部可溶性抗原檢測(cè)血清中IgM類抗體。

　　3.血凝抑制試驗(yàn)

　　(五)病毒核酸的檢測(cè)

　　1.核酸雜交技術(shù) 包括斑點(diǎn)核酸雜交、細(xì)胞內(nèi)原位雜交、DNA印跡雜交和RNA印跡雜交等。

　　2.PCR技術(shù)

　　3.高通量的病毒核酸檢測(cè)技術(shù)

　　二、病毒感染的防治原則

　　(一)病毒感染的免疫預(yù)防

　　1.人工主動(dòng)免疫 預(yù)防病毒感染的人工主動(dòng)免疫生物制品主要有減毒活疫苗、滅活疫苗、基因工程疫苗及核酸疫苗等幾類。

　　2.人工被動(dòng)免疫 人工被動(dòng)免疫是指注射含有抗病毒中和抗體的免疫血清、丙種球蛋自和IL-2，以及與細(xì)胞免疫有關(guān)的轉(zhuǎn)移因子、干擾素等，使機(jī)體立即獲得特異性免疫力(2001)。常見人工被動(dòng)免疫生物制劑有：普通免疫球蛋白、抗病毒血清、免疫調(diào)節(jié)劑等。

　　(二)抗病毒治療

　　1.化學(xué)治療

　　2.免疫治療 ①免疫調(diào)節(jié)或治療劑。②治療性疫苗。③免疫細(xì)胞的修飾和回輸。

　　3.基因治療

　　歷年經(jīng)典試題

　　某護(hù)士在給一位乙型肝炎病毒(HBV)攜帶者注射時(shí)，不慎被病人用過的針頭刺傷手指。為預(yù)防乙型肝炎病毒感染，應(yīng)首先采取的措施是(B)

　　A.注射抗生素

　　B.注射丙種球蛋白

　　C.注射乙型肝炎疫苗

　　D.注射HBIg

　　E.注射α-干擾素

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