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黃酮類化合物的顯色反應
1.還原試驗
(1)鹽酸-鎂粉(或鋅粉)反應:是鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應。
(2)四氫硼鈉(鉀)反應:在黃酮類化合物中,NaBH4對二氫黃酮類化合物專屬性較高,可與二氫黃酮類化合物反應產生紅至紫色。其他黃酮類化合物均不顯色,可與之區(qū)別。方法是在試管中加入0.1ml含有樣品的乙醇液,再加等量2%NaBH4的甲醇液,1分鐘后,加濃鹽酸或濃硫酸數(shù)滴,生成紫至紫紅色。
2.金屬鹽類試劑的絡合反應
(1)鋁鹽:常用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。生成的絡合物多為黃色,并有熒光,可用于定性及定量分析。
(2)鉛鹽:黃酮類化合物與鉛鹽生成沉淀的色澤,可因羥基數(shù)目及位置不同而異。例如,乙酸鉛只能與分子中具有鄰二酚羥基或兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基、4-酮基結構的化合物反應生成沉淀,但堿式乙酸鉛的沉淀能力要大得多。
(3)鋯鹽:多用2%二氯氧鋯甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的3-或5-羥基存在時,均可與該試劑反應生成黃色的鋯絡合物。但兩種鋯絡合物對酸的穩(wěn)定性不同。3-羥基,4-酮基絡合物的穩(wěn)定性比5-羥基,4-酮基絡合物的穩(wěn)定性強(但二氫黃酮醇除外)。故當反應液中加入枸櫞酸后,5-羥基黃酮的黃色溶液顯著褪色,而3-羥基黃酮溶液仍呈鮮黃色(鋯-枸櫞酸反應)。
(4)鎂鹽:常用乙酸鎂甲醇溶液為顯色劑,本反應可在紙上進行。試驗時在濾紙上滴加一滴供試液,噴以乙酸鎂的甲醇溶液,加熱干燥,在紫外光燈下觀察。二氫黃酮、二氫黃酮醇類可顯天藍色熒光,若具有C5-OH,色澤更為明顯。而黃酮、黃酮醇及異黃酮類等則顯黃至橙黃至褐色。
(5)氯化鍶(SrCl2):在氨性甲醇溶液中,氯化鍶可與分子中具有鄰二酚羥基結構的黃酮類化合物生成綠色~棕色乃至黑色沉淀。
(6)三氯化鐵:水溶液或醇溶液為常用的酚類顯色劑。
3.硼酸顯色反應:一般在草酸存在下顯黃色并具有綠色熒光,但在枸櫞酸-丙酮存在的條件下,則只顯黃色而無熒光。
4,堿性試劑顯色反應:在日光及紫外光下,通過紙斑反應,觀察樣品用堿性試劑處理后的顏色變化情況,對于鑒別黃酮類化合物有一定意義。
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