第 1 頁(yè):第一節(jié) 概論 |
第 2 頁(yè):第二節(jié) 薄層色譜法 |
第 3 頁(yè):第三節(jié) 高效液相色譜法 |
第 4 頁(yè):第四節(jié) 氣相色譜法 |
第 5 頁(yè):第五節(jié) 電泳法 |
第二節(jié) 薄層色譜法
一、基本原理
吸附劑對(duì)不同組分A和B具有不同吸附能力,展開劑也對(duì)A和B有不同溶解、解吸能力,當(dāng)展開劑不斷展開,A、B在吸附劑和展開劑之間連續(xù)不斷吸附解吸,產(chǎn)生差速遷移得到分離。
二、固定相
1.硅膠:含水量越高,活性越低,吸附力越弱。在105~110℃加熱30min,使其活化。硅膠G、硅膠H、硅膠GF254、硅膠HF254的含義
2.氧化鋁:堿性、中性和酸性三種;钚耘c含水量有關(guān)
3.聚酰胺:可與酚羥基、羧基、氨基酸形成氫鍵,選擇性高
三、操作方法
1.制備:1份固定相與3份水混和涂布,110℃烘30分鐘
2.點(diǎn)樣與展開:點(diǎn)樣一般為直徑2~4mm圓點(diǎn),距底2.0cm;展開距離一般為10~15cm。
3.檢視:熒光板在紫外光下檢視;普通薄層板用物理方法或顯色劑顯色。
4.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
比移值:Rf=l/l0,為組分遷移距離與展開劑遷移距離之比
比移值的最佳范圍是0.3~0.5,可用范圍是0.2~0.8。
影響比移值因素:①被分離物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。極性較強(qiáng)的組分Rf較小。②薄層板性質(zhì)。吸附劑活性越強(qiáng),Rf較小。③展開劑性質(zhì)。極性越強(qiáng)展開劑Rf值增大④展開劑蒸氣飽和程度。
3.分離度:R=2d/(W1+W2),兩相鄰斑點(diǎn)中心距離與兩斑點(diǎn)平均寬度的比值
四、應(yīng)用
1.鑒別:比較供試品與對(duì)照品溶液的比移值
2.雜質(zhì)檢查:雜質(zhì)對(duì)照品比較法;自身稀釋對(duì)照法
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